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              當(dāng)前位置:首頁(yè)  >  技術(shù)文章

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                轉(zhuǎn)基因植物EPSPS基因核酸檢測(cè)試劑盒反應(yīng)五要素:參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:①引物長(zhǎng)度:15-30bp,常用為20bp左右。②引物擴(kuò)增跨度:以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。③引物堿...

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                麻風(fēng)桿菌(ML)核酸檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)要點(diǎn):1.在適條件下,DNA—CTAB沉淀呈白色纖維狀,很容易一下子就從溶液中鉤出。不過(guò),某些植物種的DNA沉淀中可能含有雜質(zhì),特別是多糖,使DNA沉淀呈絮狀或膠狀,這種情況下可能需要稍事離心才能得到DNA.—CTAB沉淀。2.CTAB溶液在低于15℃時(shí)會(huì)析出沉淀,因此在將其加入冷凍的植物材料中之前必須預(yù)熱。3.飽和酚雖然可有效地使蛋白質(zhì)變性,但酚不能*抑制RNA酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用苯酚的混合液,可減輕這...

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                TGF-β1elisa酶聯(lián)免疫試劑盒操作步驟:1.取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置30分鐘。2.分組:取出96孔板,根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品組(6個(gè)濃度)、空白孔、待測(cè)樣品組。注:為減少實(shí)驗(yàn)誤差,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔。3.加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中;空白對(duì)照孔加入100ul的蒸餾水;其余微孔中加入100ul的待測(cè)樣本。4.加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組、待測(cè)樣本組各孔中加入50...

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                馬動(dòng)脈炎病毒(EAV)核酸檢測(cè)試劑盒反應(yīng)的特異性決定因素:①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;②堿基配對(duì)原則;③TaqDNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;④靶基因的特異性與保守性。其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及TaqDNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就...

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