過氧化氫（H2O2）測試盒微量法

特別提醒：本產品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。

產品名稱：過氧化氫（H2O2）測試盒微量法

產品規格：100管/96樣

檢測方法：微量法

產品貨號：BK-01S6408

產品分類：氧化與抗氧化系列
商品介紹：

所需的儀器和用品：

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定，了解本批樣品情況，熟悉實驗流程，避免實驗

樣本和試劑浪費！

1、樣本制備

實驗方法學：

一、肝素的配制：

市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。

肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉動，每隔5～10分鐘轉動一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集：

全血根據收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時，直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

10mg 氨甲喋呤 Amethopterin -20℃保存

2 ug pFLAG-CMV-3 pFLAG-CMV-3 低溫運輸，-20℃保存

四硫磺酸鈉亮綠培養基（TTB） Tetrathionate Broth Base 250g

1瓶 Ehrlich細胞株 Ehrlich 低溫運輸和保存

VRB-MUG瓊脂  100g

10000U MMLV逆轉錄 MMLV Reverse Transcriptase -20℃保存

250mL Phosphate Buffer，0.5M, pH7.0   Phosphate Buffer，0.5M, pH7.0   常溫保存

20次 一站式TA克隆試劑盒(含感受態) One-Stop AT Cloning Kit -20℃保存

2 ug pAP-1-Luc pAP-1-Luc 低溫運輸，-20℃保存

200 mL 大鼠淋巴細胞分離液1.083 Cell Separation Solution -20℃保存

1瓶 VERO C1008(E6)細胞株 VERO C1008(E6) 低溫運輸和保存

過氧化氫（H2O2）測試盒微量法PRMT6  組蛋白甲基轉移6抗體 規格: 0.1ml

Rabbit Anti-chicken IgG/Cy5.5  Cy5.5標記的兔抗雞IgG 規格: 0.1ml

IGFALS/ALS  胰島素樣生因子酸不穩定亞基ALS抗體 規格: 0.2ml

phospho-Tau protein(Ser404)  磷酸化微管相關蛋白抗體 規格: 0.1ml

Phospho-Jak3 (Tyr785)  磷酸化蛋白酪激JAK-3抗體 規格: 0.1ml

SCN11A/NAV1.9  鈉通道蛋白11α抗體 規格: 0.2ml

GNRPX/PLEKHJ1  核苷酸結合蛋白X抗體 規格: 0.2mlRabbit Anti-mouse IgM/Bio  標記的兔抗小鼠IgM 規格: 0.3ml

PERK  蛋白激樣內質網激抗體 規格: 0.2mlG3BP1  Ras GTP活化蛋白結合蛋白1抗體 規格: 0.1ml

phospho-IRS1(Thr176)  磷酸化胰島素受體底物1抗體 規格: 0.1mlACADVL  酰基輔A脫很鏈抗體 0.2ml

SEMA4D/CD100  臂板蛋白4D抗體 規格: 0.2mlGoat Anti-Bovine IgG/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標記的羊抗牛IgG 規格: 0.1ml

human Fibrinogen  抗體 規格: 0.2mlFactor X  凝因子10抗體 規格: 0.2ml

Somatostatin/GRIH  生抑素抗體 規格: 0.1mlPhospho-Ack1(Tyr326)  磷酸化Ack1抗體 0.1ml 

注意事項：

1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管，對照管數值在什么范圍？

對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現配現用；（2)沒有按順序加試劑；（3）反應時間不夠，可以延長反應時間（反應時間30min可以延長到40min）。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數。

若出現測定管大于對照管，可能是樣本中雜質的影響太大，為了降低雜質的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測，通常可以使測定正常。計算公式中乘以相應稀釋倍數。