Western Blot檢測試劑盒

儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現性好：變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
實驗通用規則：

GH3, 大鼠垂體生長激素腺瘤 纖維肉瘤細胞,HT1080細胞 Jurkat,Clone E6-1(T 細胞白血病細胞)1酸西他列汀質量規格：美國進口Sitagliptin Phosphate

小鼠成纖維細胞;φ2西他列汀N-硫酸鹽質量規格：美國進口Sitagliptin N-Sulfate

CTSV Others Human 人 Cathepsin V / Cathepsin L2 人細胞裂解液 (陽性對照) 西他列汀氨基甲酰β-D-葡萄糖苷酸質量規格：美國進口Sitagliptin Carbamoyl β-D-Glucuronide

中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1壯觀霉素鹽酸鹽質量規格：美國進口Spectinomycin

ULBP2 Others Human 人 ULBP2 / N2DL-2 人細胞裂解液 (陽性對照) 外消旋噻嗎洛爾-d5 馬來酸鹽質量規格：美國進口rac Timolol-d5 Maleate
大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細胞;BOS-5β-淀粉酶(酶活5萬粉末)質量規格：BR,酶活5萬,粉末beta-Amylase

CLPS Others Human 人 CLPS / Colipase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) DNA酶,脫氧核糖核酸酶Ⅰ質量規格：≥2000KU/mg protein,(牛胰)Deoxyribonuclease

CL-0185PC-3(人前列腺癌細胞)5×106cells/瓶×2煙酰胺/尼克酰胺/維生素B3質量規格：>99%,BRNicotinamide

Raji，人Butt's瘤細胞 人晶體上皮細胞系，SRA01/04細胞 C6(膠質瘤細胞)維生素B3(標準品)質量規格：HPLC≥99%,標準品Nicotinamide

人結直腸腺癌細胞;HCT-15 [HCT15]醋酸環丙孕酮,醋酸環丙氯地孕酮質量規格：>98%,BRCyproterone acetate
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/turkey/Turkey/1/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) Lipase(Candida)脂肪水解酶25克BR，類型F-300，130u/mg

人膀胱平滑肌細胞HBdSMC酯酶 Sulfatase from Helix pomatia 9016-17-5 5KU 通用試劑

CAMK2B Others Human 人 CAMK2B / CaMKII-beta 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 加醋銨 99% Formic ccid 瞇達

牛陀螺狀細胞;BT1-奈乙酸鉀，英文名或英文縮寫：NAA-K，級別：BR，99%，規格：100毫克

CHL/IU[CHL-11]細胞，中國倉鼠肺細胞 人胰腺癌細胞,PANC-1細胞 CM-R085大鼠表皮角化細胞*培養基100mL191-07-1暈本;六本并本Coronene
Western Blot檢測試劑盒人食道上皮細胞總RNAHEEpiC NA亮綠SF(淡黃)Light Green SF Yellowish質量規格：BS

TNFRSF13C Others Rat 大鼠 BAFFR / TNFRSF13C 人細胞裂解液 (陽性對照) 健那綠BJanus Green B質量規格：BS

敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21酸性綠3Guinea Green B質量規格：BS，進口原裝

PC-2細胞，人胰腺癌細胞 人皮膚癌細胞系,HS-4細胞 小鼠色素瘤瘤株;B16酸性綠 50 Lissamine™ Green B質量規格：BS,進口原裝

Hut-102(人皮膚T瘤細胞) 5×106cells/瓶×2酸性綠AAcid Green A質量規格：BS,>97%,進口分裝

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