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              幼蟲芽胞桿菌探針法熒光PCR檢測試劑盒反應五要素

              更新時間:2022-09-27      點擊次數:933

              幼蟲芽胞桿菌探針法熒光PCR檢測試劑盒反應五要素:


              參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+


              引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:


              ①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。


              ②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。


              ③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。


              ④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。


              ⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。


              ⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。


              ⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。


              引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

              α1酸性糖蛋白2抗體(類粘蛋白2)

              磷酸化水通道蛋白2抗體

              抗利尿激素/血管升壓素/加壓素/血管加壓素抗體

              ATP結合盒蛋白家族GCN20F家族1抗體

              醛糖還原酶抗體

              人血清白蛋白抗體

              活化轉錄因子4抗體

              腺苷酸激酶-1抗體

              纖維狀肌動蛋白抗體

              聚集蛋白抗體

              調亡誘導因子抗體

              調亡誘導因子抗體

              間變型淋巴瘤激酶抗體

              膜粘連蛋白A1抗體

              自噬相關蛋白1抗體

              β淀粉樣肽1-16/Aβ1-16 抗體

              銜接因子蛋白含pH域蛋白1抗體

              水通道蛋白-7抗體

              p21活化蛋白激酶ARHG7抗體

              磷酸化肌動蛋白結合蛋白Girdin抗體

              2-氨基乙硫醇雙加氧酶抗體

              血管緊張素Ⅱ-1型受體抗體

              腺苷A2b受體/神經生長因子1受體抗體


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