AMPK的相關蛋白激酶5抗體的實驗步驟

AMPK的相關蛋白激酶5抗體的實驗步驟:

一、準備好試劑與儀器:

磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。

二、實驗步驟

1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。

2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其*覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內,保溫一定時間以三十分鐘為參考。

3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。

4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。

5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。

保存條件：不使用時取試劑盒中一抗保存-20℃，其他均保存 2-8 ℃

試劑盒特點：利用LAB-SA第二代技術生產的免疫組化檢測試劑，特點是高靈敏度，特異性強、定性定位準確、背景清晰等、低倍景染色，直接滴加，操作方便，孵育時間短，適用于冷凍切片、石蠟切片及固定的細胞涂片。可用于檢測細胞、組織內的特異性抗原。